Молекулярно-генетическая природа муковисцидоза -наследственного заболевания человека
Ермоленко Д. А.,
Мисюкевич А. Ю,
Полешко А. Г.,
Волотовский И. Д.
2020
Проведен молекулярно-генетический анализ ДНК больного муковисцидозом с целью определения природы мутации, лежащей в основе данного заболевания. ДНК была получена из фибробластов больного муковисцидозом согласно общепринятым методикам. Сконструированы праймеры к фрагменту ДНК в 10-м экзоне гена CFTR, в котором локализована одна из часто встречаемых мутаций - F508del, обусловливающая муковисцидоз. С помощью ПЦР-амплификации получен фрагмент ДНК, в котором содержится данная мутация. Электрофорез амплифицированного материала выявил один продукт ДНК размером около 153 пар нуклеотидов. Методом секвенирования по Сэнгеру установлена природа и последовательность нуклеиновых оснований выделенного фрагмента ДНК. Сравнение данных о нуклеотидной последовательности, полученных после секвенирования фрагмента у больного муковисцидозом, с аналогичными данными здорового человека показало наличие мутации на уровне 10-го экзона в положении 1521-1523 кодирующей последовательности гена CFTR, представляющей собой выпадение трех пар нуклеотидов, которая, по общепринятым представлениям, относится к мутации F508del. Анализ данных секвенирования позволил отнести данную мутацию к разряду компаудных гетерозигот.
Ермоленко Д. А., Мисюкевич А. Ю, Полешко А. Г., Волотовский И. Д. Молекулярно-генетическая природа муковисцидоза -наследственного заболевания человека. Известия Национальной академии наук Беларуси. Серия биологических наук. 2020;65(3):292-298.
https://doi.org/10.29235/1029-8940-2020-65-3-292-298
Цитирование
Список литературы
1. Identification of the cystic fibrosis gene: cloning and characterization of complementary DNA / R. Riordan [et al.] // Science. - 1989. - Vol. 245, N 4922. - P. 1066-1073. https://doi.org/10.1126/science.2475911
2. Mutation analysis and haplotype correlation for 139 cystic fibrosis patients from the Nebraska Regional Cystic Fibrosis Center / M. D. Traystman [et al.] // Human Mutation. - 1993. - Vol. 2, N 1. - P. 7-15. https://doi.org/10.1002/humu.1380020103
3. From CFTR biology toward combinatorial pharmacotherapy: expanded classification of cystic fibrosis mutationsn / G. Veit [et al.] // Mol. Biol. Cell. - 2016. - Vol. 27, N 3. - P. 424-433. https://doi.org/10.1091/mbc.e14-04-0935
4. Correction of the AF508 mutation in the cystic fibrosis transmembrane conductance regulator gene by zinc-finger nuclease homology-directed repair / C. M. Lee [et al.] // BioRes. Open Access. - 2012. - Vol. 1, N 3. - P. 99-108. https://doi.org/10.1089/biores.2012.0218
5. Tsui, L.-C. The cystic fibrosis gene: a molecular genetic perspective / L.-C. Tsui, R. Dorfman // Cold Spring Harbor Perspectives Med. - 2013. - Vol. 3, N 2. - P. a009472. https://doi.org/10.1101/cshperspect.a009472
6. Экспериментальные подходы к таргетному редактированию гена CFTR с помощью CRISPR/Cas9 / С. А. Смир-нихина [и др.] // Вестн. Рос. гос. мед. ун-та. - 2018. - № 2. - С. 15-21. https://doi.org/10.24075/brsmu.2018.022
7. Лагодич, А. В. Методы анализа нуклеиновых кислот : учеб.-метод. пособие / А. В. Лагодич, О. В. Лагодич. -Минск : БГУ, 2013. - 47 с.
Похожие публикации