Получение рекомбинантного белка человеческого фактора некроза опухоли-альфа в клет- ках бактерий Escherichia coli и оценка его биологической активности

Копылева Д. В., Прокулевич В. А., Потапович М. И., Дуж Е. В., Гончаров А. Е., Антоневич Н. Г., Бушмакина И. М.
2026

В работе представлены ключевые стадии получения субстанции рекомбинантного человеческого фактора некроза опухоли-альфа (ФНО-α) в клетках бактерий Escherichia coli. Описаны этапы конструирования нук- леотидной последовательности и клонирование гена в составе вектора pET24b(+) под промотором бактериофага Т7. Сконструирован потенциальный штамм-продуцент рекомбинантного белка на основе E. coli BL21-Gold(DE3), способный к наработке растворимой формы ФНО-α в количестве, превышающем 30 % от общего белка клетки. Осуществлена очистка целевого белка с использованием тандемной ионообменной и эксклюзионной хроматографий. Определена биологическая активность полученного образца в рамках стандартного протокола производства биомедицинских клеточных продуктов на основе дендритных клеток (ДК). Установлена жизнеспособность ДК, достоверно не отличающаяся в контрольной и опытной группах и превышающая 90 %. Вместе с тем образец ФНО-α характеризуется усилением экспрессии молекул-маркеров зрелых ДК CD83 и HLA-DR. Полученные данные свидетельствуют о высокой иммунобиологической активности в сравнении с доступным коммерческим препаратом, а также о потенциальной возможности импортозамещения.

Копылева Д. В., Прокулевич В. А., Потапович М. И., Дуж Е. В., Гончаров А. Е., Антоневич Н. Г., Бушмакина И. М. Получение рекомбинантного белка человеческого фактора некроза опухоли-альфа в клет- ках бактерий Escherichia coli и оценка его биологической активности. Известия Национальной академии наук Беларуси. Серия биологических наук. 2026;71(1):44-55. https://doi.org/10.29235/1029-8940-2026-71-1-44-55
Цитирование

Список литературы

Похожие публикации

Источник