17 Копылева Д. В. Прокулевич В. А. Потапович М. И. Дуж Е. В. Гончаров А. Е. Антоневич Н. Г. Бушмакина И. М. фактор некроза опухоли-альфа Escherichia coli хроматография индукция биосинтеза клонирование экспрессия эндотоксины дендритные клетки биомедицинские клеточные продукты CD83 HLA-DR проточная цитофлуориметрия 2026 2026-02-02 10.29235/1029-8940-2026-71-1-44-55 Известия Национальной академии наук Беларуси. Серия биологических наук В работе представлены ключевые стадии получения субстанции рекомбинантного человеческого фактора некроза опухоли-альфа (ФНО-α) в клетках бактерий Escherichia coli. Описаны этапы конструирования нук- леотидной последовательности и клонирование гена в составе вектора pET24b(+) под промотором бактериофага Т7. Сконструирован потенциальный штамм-продуцент рекомбинантного белка на основе E. coli BL21-Gold(DE3), способный к наработке растворимой формы ФНО-α в количестве, превышающем 30 % от общего белка клетки. Осуществлена очистка целевого белка с использованием тандемной ионообменной и эксклюзионной хроматографий. Определена биологическая активность полученного образца в рамках стандартного протокола производства биомедицинских клеточных продуктов на основе дендритных клеток (ДК). Установлена жизнеспособность ДК, достоверно не отличающаяся в контрольной и опытной группах и превышающая 90 %. Вместе с тем образец ФНО-α характеризуется усилением экспрессии молекул-маркеров зрелых ДК CD83 и HLA-DR. Полученные данные свидетельствуют о высокой иммунобиологической активности в сравнении с доступным коммерческим препаратом, а также о потенциальной возможности импортозамещения. https://www.academjournals.by/publication/20353 https://www.academjournals.by/files/20225