Разработка и валидация метода высокочувствительной высокоэффективной жидкостной хроматографии для количественного определения кетоконазола
Разработан метод изократической высокоэффективной жидкостной хроматографии для количественного анализа кетоконазола в его стабильной форме. Хроматографическое разделение проводилось с использованием колонки Xterra RP C18 (250´3.0 мм) с размером частиц 5 мкм, детектирование — с помощью УФ-излучения при 244 нм. Время выполнения последовательности 8 мин, приэтом средний пик аналита элюировался при 3.469 мин при поддержании скорости потока 1.0 мл/мин. Подготовка образца и подвижной фазы быстрая и высокоэкономичная, что значительно снижает вероятность ошибки. Продолжительность анализа ~8 мин, при этом аналит элюировался менее чем за 5 мин, что значительно улучшает эффективность по сравнению с более ранними результатами. Эффективность метода проверена в соответствии с принципами Международной конференции по гармонизации (ICH) на специфичность, пригодность системы, пределы обнаружения (LOD = 10 мкг/мл) и количественного определения (LOQ = 30 мкг/мл), линейность, точность и прецизионность. Регрессионный анализ выявил коэффициент корреляции 0.9982. С помощью исследования восстановления оценена точность метода на уровнях 80, 100 и 120%,значения находятся в приемлемом диапазоне (%RSD < 2%). Точность экспериментов RSD = 1.0% соответствует руководящим принципам ICH.
