17 Пилютина О. Ю. Войтехович А. С. Фомина Е. Г. Григорьева Е. Е. Фомин И. К. лентивирусы лентивирусные векторы Vpx дендритные клетки экспрессия генов 2025 2025-11-06 10.29235/1561-8323-2025-69-5-404-415 Доклады Национальной академии наук Беларуси Дендритные клетки (ДК) содержат высокую концентрацию антивирусного фактора SAMHD1, который ингибирует размножение лентивирусов. Некоторые представители лентивирусов обезьян, такие как SIVmac, кодируют вспомогательный белок Vpx, который является антогонистом SAMHD1 и блокирует его действие в инфицируемых клетках для повышения эффективности размножения. Однако лентивирус человека HIV-1, на основе которого получены подавляющее большинство векторных систем для введения и экспрессии генов, не кодирует Vpx и инфицирует ДК с низкой эффективностью. Исходя из этого, было сделано предположение, что упаковка Vpx белка SIVmac в вирионы лентивирусных векторов на основе HIV-1 может увеличивать их инфекционность на ДК. Для придания лентивирусной векторной системе на основе HIV-1 способности упаковывать в вирионы белок Vpx SIVmac239 в векторную систему были введены ряд изменений. На основе анализа структурной и функциональной гомологии белков p6 HIV-1 и SIVmac239 были определены аминокислотные последовательности, замена которых в составе p6 HIV-1 позволяла бы специфически упаковывать экзогенный белок Vpx SIVmac239 и оказывала минимальное влияние на структуру белка. Для экспрессии белка Vpx SIVmac239 в клетках человека была получена кодон-оптимизированная последовательность гена Vpx. Результаты показали, что упаковка Vpx белка в вирионы модифицированных лентивирусов является критичной для их инфекционности на ДК, так как вирус «дикого типа», полученный даже в присутствии Vpx белка, был не способен продуктивно инфицировать ДК, поскольку не содержит белковых детерминант для упаковки Vpx. Эффективность введения маркерного гена в ДК при помощи модифицированной векторной системы для различных доноров составила 90–97 %. Отличительной особенностью векторной системы является ее способность упаковывать Vpx белок SIVmac непосредственно в вирионы HIV-1, что дает возможность напрямую вводить вирусные векторы на основе HIV-1 в ДК, без предварительной их обработки обезьяньим вирусом SIVmac. Таким образом, модифицированная векторная система может быть использована для эффективного введения и долговременной экспрессии генов в ДК человека. https://www.academjournals.by/publication/19985 https://www.academjournals.by/files/19868