Взаимодействия рекомбинантного лактоферрина человека с дезоксирибонуклеиновыми кислотами

Семенов Д. А., Валентович Л. Н., Охремчук Е. В., Серченя Т. С., Вашкевич И. И., Свиридов О. В.
2025

Изучена способность рекомбинантного лактоферрина человека (рчЛФ), выделенного в чистом виде из молока трансгенных коз, к неспецифическим взаимодействиям и к специфическому комплексообразованию с природной и синтетическими фрагментами ДНК с использованием интактного рчЛФ, содержащего в металлсвязывающем центре ион европия, обладающего долгоживущей флуоресценцией. В микропланшетной системе меченый рчЛФ взаимодействует с адсорбционно иммобилизованной общей двухцепочечной ДНК из тимуса теленка с Ка = 1,7  106 M–1. В этой же гетерофазной системе однои двухцепочечные (ds-) олигонуклеотиды со специфической (L) или неспецифической (S) последовательностями связываются в растворе с рчЛФ–Eu3+ и конкурентно ингибируют взаимодействие меченого белка с ДНК на твердой фазе. Ингибирующий эффект зависит от специфичности, структуры и длины нуклеотидной последовательности, уменьшаясь в ряду: ds-L25 > ds-S50 > ds-S215 > ds-S180 > ds-S115 > L25 > S50. В другой системе на твердой фазе, покрытой биотинсвязывающим белком стрептавидином, иммобилизовались биотинилированные через длинный подвижный линкер специфический (ds-L25) и неспецифический (ds-S50) олигонуклеотиды. Сродство рчЛФ к этим лигандам характеризуется Ка соответственно 6,4  107 и 7,1  106 M–1. Связывание с неспецифической нуклеотидной последовательностью отличалось также гораздо большей чувствительностью к ионной силе раствора и содержанию инертного белка. Способность рчЛФ взаимодействовать с ДНК послужило бы дальнейшему подтверждению идентичности природного и рекомбинантного белков и повышению оценки рчЛФ как биологически активной пищевой добавки и фармацевтической субстанции. 

Семенов Д. А., Валентович Л. Н., Охремчук Е. В., Серченя Т. С., Вашкевич И. И., Свиридов О. В. Взаимодействия рекомбинантного лактоферрина человека с дезоксирибонуклеиновыми кислотами. Доклады Национальной академии наук Беларуси. 2025;69(4):279-290. https://doi.org/10.29235/1561-8323-2025-69-4-279-290
Цитирование

Список литературы

Похожие публикации

Источник