СИНТЕЗ РЕКОМБИНАНТНОГО СН2-СН3 УЧАСТКА Fс-ФРАГМЕНТА IgG1 ЧЕЛОВЕКА И ЕГО ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ МЫШИНЫХ ПОЛИКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ
Ткачев С. В.,
Фомина Е. Г.,
Григорьева Е. Е.,
Счесленок Е. П.,
Семижон П. А.,
Школина Т. В.,
Маханько О. В.,
Владыко А. С.
2017
В клетках E. coli синтезирован рекомбинантный белок rFс IgG, представляющий собой СН2 и СН3 домены Fc-фрагмента γ-цепи IgG1 человека. Белок rFс IgG является полидетерминантным антигеном, содержащим линейные эпитопы для антител к IgG человека. Проведена иммунизация мышей белком rFс IgG. Показано, что rFс IgG обладает высокой иммуногенностью для мышей и может быть использован для получения антивидовых поликлональных антител к IgG человека. Обнаружено, что мышиные поликлональные антитела к rFc IgG проявляют слабо выраженную перекрестную реактивность в отношении IgM человека, а кроме того, выявлена высокая вариабельность значений титров антител, полученных от разных животных. Для решения этих проблем предлагается проводить оценку качества материала, полученного в результате каждой иммунизации, и отбирать подходящие образцы антител с учетом их авидности, специфичности и титра.
Ткачев С. В., Фомина Е. Г., Григорьева Е. Е., Счесленок Е. П., Семижон П. А., Школина Т. В., Маханько О. В., Владыко А. С. СИНТЕЗ РЕКОМБИНАНТНОГО СН2-СН3 УЧАСТКА Fс-ФРАГМЕНТА IgG1 ЧЕЛОВЕКА И ЕГО ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ МЫШИНЫХ ПОЛИКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ. Известия Национальной академии наук Беларуси. Серия медицинских наук. 2017;(4):41-47.
Цитирование
Список литературы
1. The production of polyclonal antibodies in laboratory animal. The report and recommendations of ECVAM workshop 35 / P.P. Leenaars [et al.] // ATLA. – 1999. – Vol. 27, N 1. – P. 79–102.
2. Кэтти, Д. Антитела. Методы : пер. с англ. / Д. Кэтти, Ч. Райкундалиа. – М. : Мир, 1991. – Т. 2. – 382 с.
3. Novotny, J. Location of antigenic epitopes on antibody molecules / J. Novotny, M. Handschumacher, E. Haber // J. Mol. Biol. – 1986. – N 4. – P. 715–721.
4. Hajighasemi, F. Production and characterization of mouse monoclonal antibodies recognizing human pan-IgG specific conformational or linear epitopes / F. Hajighasemi, J. Khoshnoodi, F. Shokri // Avicenna J. Med. Biotech. – 2012. – Vol. 4, N 4. – P. 170–177.
5. Characterization of epitopes of pan-IgG/anti-G3m(u) and anti-Fc monoclonal antibodies / P. Nelson [et al.] // Immunol. Lett. – 2003. – Vol. 88, N 1. – P. 77–83.
6. Characterization of anti-IgG monoclonal antibody A57H by epitope mapping / N. Nelson [et al.] // Biochem. Soc. Transact. – 1997. – Vol. 25, N 2. – P. 373.
7. Schroeder Jr., H.W. Immunoglobulins: structure and function / H.W. Schroeder Jr., D. Wald, N.S. Greenspan // Fundamental Immunology / ed. W.E. Paul. – 7rd ed. – Philadelphia : Wolters Kluwer Health ; Lippincott Williams & Wilkins, 2013, XVIII. – 1283 p.
8. Laemmli, U.K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4 / U.K. Laemmli // Nature. – 1970. – Vol. 227. – P. 680–685.
Похожие публикации