17 Серченя Т. С. Охремчук Е. В. Валентович Л. Н. Лапина В. С. Свиридов О. В. патогенные бактерии Salmonella enterica полимеразная цепная реакция иммуноанализ с времяразрешенной флуориметрией иммунохроматографический анализ 2024 2024-11-30 10.29235/1561-8331-2024-60-4-314-325 Известия Национальной академии наук Беларуси. Серия химических наук Разработаны и исследованы четыре модельные биоаналитические системы, специфичные к бактериям Salmonella enterica, в которых в результате полимеразной цепной реакции (ПЦР) продуцировался содержащий остатки биотина и флуоресцеина ампликон ДНК. Это позволило иммобилизовать ампликон в функционализиро- ванной твердой фазе и биоспецифически пометить хелатом европия в микропланшетах или золотыми наночастицами на хроматографической мембране. Количественная детекция модифицированной ДНК осуществлялась в системах иммуноанализа с времяразрешенной флуоресценцией Eu3+ (лантанидный иммунофлуоресцентный анализ, ЛИФМА, DELFIA) или с фотометрией окрашенной зоны на хроматографической полоске (ИХА). Разработаны и исследованы три пары праймеров для получения выбранных фрагментов гена invA, присутствующего в геномах всех патогенных сальмонелл. Установлена их пригодность для тест-систем. В микропланшетной системе ЛИФМА диапазон определяемых концентраций полученного ампликона ДНК составил 0,01–10,0 нМ, а предел обнаружения оказался равным 2 пМ. Предел визуальной детекции ампликонов ДНК в ИХА составил 0,05 нМ. Показана возможность проведения тестирования ампликонов без дополнительного выделения ДНК в чистом виде из реакционной смеси. Установлена высокая специфичность разработанных биоаналитических систем для детекции Salmonella enterica различных серотипов. https://www.academjournals.by/publication/12053 https://www.academjournals.by/files/12019