%0 article
%A Шишлова-Соколовская А. М., 
%A Урбанович О. Ю., 
%T CRISPR/Cas9-опосредованный направленный мутагенез гена PDS <i>Nicotiana tabacum</i> L.
%D 2024
%R 10.29235/1029-8940-2024-69-4-298-308
%J Известия Национальной  академии наук Беларуси. Серия биологических наук
%X Система CRISPR/Cas9 является одним из эффективных инструментов для редактирования геномов растений. С помощью этой системы нами получены трансформанты Nicotiana tabacum с различным фенотипом, несущие в своем геноме мутационные события инсерционно-делеционного типа в гене PDS, кодирующем фермент 15-цис-фитоендесатуразу. Эндогенный ген табака NtPDS был выбран в качестве мишени, так как внесение мутаций в его нуклеотидную последовательность позволяет легко визуализировать признаки. Тетрааллельный нокаут гена NtPDS приводил к полному альбинизму растений. Трансформанты-альбиносы отличались более медленным ростом, карликовостью и были нежизнеспособны при культивировании in vitro. Мутанты с пестролистностью в культуре in vitro образовывали корни и не отличались от контрольных растений по размеру листьев. Анализ нуклеотидной последовательности протоспейсера гена мишени NtPDS был выполнен на случайной выборке, включавшей 21 трансгенное растение поколения Т0 с различным фенотипом – от полностью альбиносного до дикого типа. Результаты секвенирования показали, что все трансформанты с видимыми фенотипическими проявлениями несут мутантные последовательности в гене NtPDS с частотой 51,0‒80,0 %, при этом эффективность направленного мутагенеза составила 33,33 %. У трансформантов с фенотипом дикого типа не обнаружено мутированных последовательностей в мишени.
%U https://www.academjournals.by/publication/11393