RT - article
SR - Electronic
T1 - Трансгенные кролики с генами гранулоцит-колониестимулирующего фактора человека и зеленого флуоресцирующего белка
JF - Известия Национальной академии наук Беларуси. Серия аграрных наук
SP - 2025-01-28
DO - 10.29235/1817-7204-2025-63-1-45-57
A1 - Колоскова Е. М., 
A1 - Езерский В. А., 
A1 - Трубицина Т. П., 
A1 - Жукова О. Б., 
A1 - Остренко К. С., 
A1 - Белова Н. В., 
A1 - Кутьин И. И., 
A1 - Рябых В. П., 
YR - 2025
UL - https://www.academjournals.by/publication/10791
AB - Гранулоцит-колониестимулирующий фактор человека (GCSF, ГКСФ) – один из белков фармакологического назначения, который может быть выделен из молока трансгенных (ТГ) животных. Была получена плазмида, содержащая ген GCSF человека под контролем регуляторных элементов гена β-лактоглобулина крупного рогатого скота, и ген репортерного зеленого флуоресцентного белка (ЕGFP) под цитомегаловирусным (cmv) промотором. Использование выбранных промоторов обеспечивает тканеспецифичную экспрессию целевого белка в молочной железе ТГ животного-продуцента и высокий уровень ранней экспрессии репортерного белка в клетках эукариот, что позволяет детектировать ТГ эмбрионы на стадии культивирования и производить их предымплантационный отбор. Тестирование конструкции для оценки ее эффективности проводили на ТГ кроликах, полученных методом микроинъекции в мужской пронуклеус зигот. Был сделан вывод о токсичности GFP для эмбрионов на ранних стадиях развития из-за чрезмерной экспрессии гена EGFP под сильным cmv промотором. Была получена ТГ крольчиха (F0), у которой методом ИФА был оценен уровень ГКСФ человека в молоке и сыворотке крови. Из 22 крольчат, полученных от нее за четыре окрола, два были трансгенны. От ТГ самца F0 было получено потомство (F1), 56 % которого составляли самцы, из них 88 % были ТГ и по состоянию здоровья не отличались от обычных кроликов. Среди самок ТГ было 10 %, и они погибали в течение двух недель после рождения.