17 Колоскова Е. М. Езерский В. А. Трубицина Т. П. Жукова О. Б. Остренко К. С. Белова Н. В. Кутьин И. И. Рябых В. П. трансгенные кролики микроинъекции эмбрион генная конструкция GCSF ЕGFP 2025 2025-01-28 10.29235/1817-7204-2025-63-1-45-57 Известия Национальной академии наук Беларуси. Серия аграрных наук Гранулоцит-колониестимулирующий фактор человека (GCSF, ГКСФ) – один из белков фармакологического назначения, который может быть выделен из молока трансгенных (ТГ) животных. Была получена плазмида, содержащая ген GCSF человека под контролем регуляторных элементов гена β-лактоглобулина крупного рогатого скота, и ген репортерного зеленого флуоресцентного белка (ЕGFP) под цитомегаловирусным (cmv) промотором. Использование выбранных промоторов обеспечивает тканеспецифичную экспрессию целевого белка в молочной железе ТГ животного-продуцента и высокий уровень ранней экспрессии репортерного белка в клетках эукариот, что позволяет детектировать ТГ эмбрионы на стадии культивирования и производить их предымплантационный отбор. Тестирование конструкции для оценки ее эффективности проводили на ТГ кроликах, полученных методом микроинъекции в мужской пронуклеус зигот. Был сделан вывод о токсичности GFP для эмбрионов на ранних стадиях развития из-за чрезмерной экспрессии гена EGFP под сильным cmv промотором. Была получена ТГ крольчиха (F0), у которой методом ИФА был оценен уровень ГКСФ человека в молоке и сыворотке крови. Из 22 крольчат, полученных от нее за четыре окрола, два были трансгенны. От ТГ самца F0 было получено потомство (F1), 56 % которого составляли самцы, из них 88 % были ТГ и по состоянию здоровья не отличались от обычных кроликов. Среди самок ТГ было 10 %, и они погибали в течение двух недель после рождения. https://www.academjournals.by/publication/10791 https://www.academjournals.by/files/10758